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上海通蔚生物實驗室中細(xì)胞系劃痕實驗常見的問題解答
更新時間:2025-12-18   點擊次數(shù):324次

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問題一:細(xì)胞系劃痕實驗為什么這么重要

答:因為細(xì)胞系劃痕實驗是觀察細(xì)胞系遷移活動的重要技術(shù)手段,而且簡單快捷、經(jīng)濟實惠(劃重點?。?。

問題二:細(xì)胞系劃痕實驗為什么一般選擇6孔板

答:因為6孔板大小適中,可保證有相當(dāng)距離的平直劃痕,便于觀察;當(dāng)然若是需要高通量初篩時,也可以用12或者24孔板。

問題三:為什么細(xì)胞系接種密度要求過夜100%融合

答:如果過夜后細(xì)胞系=沒有100%融合,雖然可以適當(dāng)延長培養(yǎng)時間,但因細(xì)胞系密度已經(jīng)很大,所以細(xì)胞系狀態(tài)會逐漸變差,后續(xù)細(xì)胞系可能不遷移而是凋亡。

問題四:怎樣避免細(xì)胞系增殖對細(xì)胞系遷移實驗造成的假陽性結(jié)果

答:操作如下

1、使用無血清或低血清培養(yǎng)基(<2%)可降低細(xì)胞系增殖對實驗結(jié)果的影響

2、一般認(rèn)為24h為細(xì)胞系的一個周期,在選取合適的時間點(6,12,24h)檢測劃痕寬度時,不要超過細(xì)胞系一個周期的時間

3、如果要單純考慮細(xì)胞系遷移,可以先用(1ug/ml)處理1h,抑制細(xì)胞系的分裂。

問題五:結(jié)果怎樣拍照

答:按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕,可以形成若干交叉點,劃痕一次與5條定位線相交,就有10個可固定監(jiān)測點,以解決了前后觀察時位置不固定的問題。

問題六:細(xì)胞系不遷移怎么回事?

答:避開細(xì)胞系狀態(tài)的影響,需要考慮細(xì)胞系自身的遷移能力,并非所有細(xì)胞系都適合劃痕實驗,以乳腺癌為例,乳腺癌細(xì)胞系MCF-7幾乎很難遷移,而MDA-MB-231具有很強遷移性。

問題七:結(jié)果統(tǒng)計中,細(xì)胞系計數(shù)和統(tǒng)計面積那個好用?

答:根據(jù)細(xì)胞系劃痕實驗的實驗結(jié)果選擇。如果細(xì)胞系遷移輪廊比較清晰,并且遷移數(shù)量不多,我們可以選擇細(xì)胞系計數(shù);但如果細(xì)胞系數(shù)比較多,連片生長,那么統(tǒng)計面積比細(xì)胞系計數(shù)的方式更簡便且客觀。

問題八:細(xì)胞系劃痕技術(shù)有什么不足嗎

答:細(xì)胞系劃痕實驗的不足主要包括:

1、適用的細(xì)胞系類型范圍小,一是需要遷移強的細(xì)胞系,而且對無血清的環(huán)境有較強的忍受力(至少24h)12h細(xì)胞系凋廣就超過50%。

2、自身操作的實驗誤差,如劃痕距離不一致等。

上是通蔚生物帶您了解實驗室中細(xì)胞系培養(yǎng)的方法及注意事項,您知道了嗎?上海通蔚生物將進一步加強人才培養(yǎng)、產(chǎn)品創(chuàng)新,持續(xù)不斷地提升企業(yè)核心竟?fàn)幜?,實現(xiàn)具有高科技產(chǎn)業(yè)體系、知識化創(chuàng)業(yè)團隊的化大集團企業(yè),更好、更快捷、更的服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域,迎接新一輪世界經(jīng)濟一體化所帶來的機遇與挑戰(zhàn)。

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