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減少ELISA實驗誤差需注意哪些
更新時間:2023-06-07   點擊次數(shù):1613次

ELISA試劑盒實驗操作中,誤差分有系統(tǒng)誤差、偶然誤差、過失誤差,而一個小小的誤差主意能夠影響到實驗,那么怎樣才能縮小實驗誤差呢?


ELISA試劑盒注意的地方

1. 檢驗技師應(yīng)具備從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能熟練操作實驗儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。


2. 使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。


3. 仔細閱讀說明書,嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方,反復試驗確定成立后才能改進。


4. 洗滌che底,如若洗板不che底,酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能出現(xiàn)假陽性。


5. 嚴控反應(yīng)時間,反應(yīng)時間過長,酶失活;反應(yīng)時間過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。


6. 注意試劑盒保存期,過保存期的試劑不能使用。


7. 評估試劑的實用性,試劑的穩(wěn)定與否,對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗,判定試劑符合要求后方可使用。


8. 嚴格掌握顯色時間,顯色時間過短,加入終止液反應(yīng)終止后,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應(yīng)判為假陽性,這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結(jié)果。


9. 加樣要準確、快速。如果加樣不準確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結(jié)果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。要求在一定時間內(nèi)加樣完畢的實驗,如果加樣遲緩,便出現(xiàn)誤差,而且試劑長時間暴露在外,尤其室溫過高時,保存期會縮短甚至失效。


以上是減少ELISA實驗誤差需注意哪些.上海通蔚生物公司主營的產(chǎn)品有elisa試劑盒、生化試劑盒、抗體、重組蛋白、標準品、對照品、培養(yǎng)基、血清、酶、實驗耗材、進口試劑及實驗外包服務(wù)等。提供各種抗體、免疫學相關(guān)的檢測試劑盒、胎牛血清,動物抗血清等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù),涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學范疇。完善的庫存及供給體系以及高效安穩(wěn)的技術(shù)指導,保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供給。

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